پاورپوینت آزمایشگاه میکروبیولوژی .. (pptx) 9 اسلاید
دسته بندی : پاورپوینت
نوع فایل : PowerPoint (.pptx) ( قابل ویرایش و آماده پرینت )
تعداد اسلاید: 9 اسلاید
قسمتی از متن PowerPoint (.pptx) :
بنام خدا
آزمایشگاه میکروبیولوژی
رنگ آمیزی مقاوم به اسید (Acid-Fast Stain )
اکثرباکتریها با روش رنگ آمیزی ساده یا گرم قابل رنگ آمیزی هستند.
چند جنس از باکتریها از جمله مایکوباکتریوم ها در برابر رنگ آمیزی معمول مقاومت میکنند و تنها با رنگ آمیزی مقاوم به اسید قابل مشاهده خواهند بود.
مایکوباکتریوم توبرکلوزیس و مایکوباکتریوم لپره از جمله باکتریهای بیماریزای انسانی می باشند که باسیل شکل، کمی خمیده، بی حرکت و بدون اسپور هستند.
تفاوت مایکوباکتریومها با سایر میکروارگانیسم ها به ترکیبات دیواره آنها مربوط میشود که دارای دیواره ای ضخیم و غنی ازترکیبات لیپیدی هستند که مانع از نفوذ رنگ به درون سلول میشود.
از طرف دیگر در صورت نفود رنگ به درون سلول باکتری، تحت تاثیر عامل بیرنگ کننده ای مثل اسید الکل رنگ خود را از دست نمیدهند .
تشخیص مایکوباکتریوم ها
جداسازی موفق این باکتریها از نمونه های بالینی با نمونه گیری و انتقال مناسب آغاز میشود.
حتی الامکان نمونه ها باید قبل از درمان گرفته و سریعا به آزمایشگاه منتقل شود. در غیراینصورت حداکثر تا یک شبانه روز در یخچال نگهداری کرد.
نمونه ها : خلط، شیره معده ، مایع شکمی ، ادرار ، بافت های آلوده باید آلودگی زدایی شوند.
مایع مفصلی و مایع مغزی نخاعی نیاز به آلودگی زدایی ندارد
برای عمل آلودگی زدایی و هضم ساده ترین راه استفاده از سود 4-3 درصد است.
بعد از آن نمونه ها سانتریفیوژکرده و از رسوب حاصل گسترش تهیه کرده و بر روی محیط مخصوص نیز کشت می شود.
رنگ آمیزی اسید فست
زیل – نلسون ( رنگ امیزی گرم )
کاینیون (رنگ آمیزی سرد )
رودامین – اورامین ( استفاده از رنگ های فلورسنت ، بررسی با میکروسکوپ فلورسنت )
رنگ آمیزی زیل - نلسون
گسترش تهیه شده را با حرارت ثابت کنید.
محلول کربول فوشین را روی گسترش ریخته و به مدت 5 دقیقه حرارت داده ، بطوریکه بخار متصاعد شود ولی نجوشد و خشک نشود. به محض تبخیر رنگ فوشین تازه اضافه کنید.
در روش کینیون از حرارت استفاده نمی شود ولی رنگ کربول فوشین به مدت 15 دقیقه روی لام میماند.
اجازه دهید لام خنک شود.
لام با آب شسته شود.
گسترش را با محلول اسید الکل بیرنگ نمایید
لام با آب شسته شود.
روی لام متیلن بلو ریخته و 2-1 دقیقه صبر کنید.
لام با آب شسته شود.
لام را خشک کرده و یک قطره روغن ایمرسیون روی آن گذاشته و با عدسی 100 میکروسکوپ مطالعه نمایید.
توجه: لام تهیه شده مخلوطی از واکسن BCG است . در این حالت مایکوباکتریوم بوویس باسیل کوتاه ، کلفت و مستقیم است و یکنواخت رنگ میگیرد.
باسیل انسانی ، بلند ، باریک و خمیده است و یکنواخت رنگ نمیگیرد.